機能化糖鎖のパイオニア

株式会社ネーテック


「基礎データ」

血液細胞のレクチンに対する親和性の比較



レクチンを介した選択的な細胞接着が得られます。

  • 材料・方法
  • α-1,6-galactoseで修飾されたG-Coatディッシュを使用。
  • 大豆レクチン:Soybean agglutinin (SAB)は糖結合部を持つ4つのサブユニットで
  • IIII構成される分子量120KDaの糖たんぱく質で、N-acetylgalactosamineとgalactoseに
  • IIII優先的に結合する。
  • 後の臍帯血由来の造血幹細胞以外は、健常な成人末梢血由来である。
  • 各血球は、ベクトン・ディッキンソン社のモノクローナル抗体とフローサイトメーターで
  • IIII分類された。

  • 結果
  • 300 μg/mLのSBAで処理されたディッシュに対する末梢血の成熟細胞の接着性は、
  • IIII赤血球、顆粒球>リンパ球>NK細胞の順となった。
  • SBAの濃度を100 μg/mL以下にすると白血球が非接着細胞として赤血球から分離され
  • IIIIた。
  • 未熟な造血幹細胞は、処理濃度を800 μg/mLにしても21%という低い接着率であった。
  • Transfusion 48(3):561 (2008)




NK細胞の濃縮(ネガティブセレクション)

  • 材料・方法
  • 1.077g/mLの比重遠心分離法で成人末梢血から単核球分画を濃縮。
  • ガラクトースとグルコースで修飾されたG-コートディッシュ(Φ:35 mm)にガラクトース
  • IIII特異的なECLレクチン(10 ng/mL) を添加し、室温で60分間処理する。
  • このレクチン固定化ディッシュに、0.2%牛血漿アルブミンを添加したダルベッコPBS (-)に
  • IIII懸濁させた濃縮単核球を2 x 10個播種する。
  • 細胞懸濁液を入れたディッシュを37℃、30分インキュベートする。
  • 上清に浮遊している非接着細胞を回収し、フローサイトメトリーでNK細胞とTリンパ球の
  • IIII接着率を算出する。



  • 結果
  • ガラクトースの修飾密度を下げることによってNK細胞の損失が低減した。
  • バッファーの組成やインキュベーション条件を改良することによって濃縮効率を向上させる
  • IIII可能性がある。



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